タイトル(別表記) | Studies on l-Glutamate Oxidase with Strict Substrate Specificity from Streptomyces sp. |
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フルテキストURL | srfa_112_013_018.pdf |
著者 | 中山 夏女| 稲垣 賢二| |
抄録 | l-glutamate oxidase (LGOX) from Streptomyces sp. is a heterohexameric flavin enzyme that catalyzes the oxidative deamination of l-glutamate to form α-ketoglutarate with ammonia and hydrogen peroxide. LGOX shows strict substrate specificity for l-Glu. In addition, it is highly thermostable and pH stable. Because of these properties, LGOX is currently used as a biosensor for the trace determination of l-Glu in the food industry and clinical laboratories. The full-length cDNA is 2103 bp and is encoded by a single polypeptide chain consisting of 701 residues including subunits α-γ-β. The LGOX gene was heterologously expressed in Escherichia coli JM109. The LGOX precursor expressed in E. coli is a homodimer with weak enzymatic activity and becomes a heterohexamer upon activation by protease treatment. X-ray crystallography and docking studies of purified recombinant LGOX suggest that the Arg305 residue is a key residue for substrate recognition. Mutant analysis showed that Arg305 is essential for substrate recognition, as the activity toward l-Glu was greatly reduced and substrate specificity was changed in some enzymes. The functional analysis of R305E-LGOX, which is an l-Arg oxidase, revealed that R305E-LGOX can be used as a enzyme biosensor for l-Arg. |
キーワード | l-glutamate oxidase biosensor substrate recognition X-ray crystallography modification of substrate specificity |
出版物タイトル | 岡山大学農学部学術報告 |
発行日 | 2023-02-01 |
巻 | 112巻 |
開始ページ | 13 |
終了ページ | 18 |
ISSN | 2186-7755 |
言語 | 日本語 |
論文のバージョン | publisher |
著者 | 田村 隆| 田中 英彦| 稲垣 賢二| |
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発行日 | 2003-02 |
出版物タイトル | 岡山大学農学部学術報告 |
巻 | 92巻 |
号 | 1号 |
資料タイプ | 紀要論文 |
著者 | Takahata, Muneaki| Tamura, Takashi| Abe, Katsumasa| Mihara, Hisaaki| Kurokawa, Suguru| Yamamoto, Yoshihiro| Nakano, Ryuhei| Esaki, Nobuyoshi| Inagaki, Kenji| |
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発行日 | 2008-06-26 |
出版物タイトル | Journal of Biochemistry |
巻 | 143巻 |
号 | 4号 |
資料タイプ | 学術雑誌論文 |
著者 | 田代 (山田) 百合子| 田村 隆| 田中 英彦| 稲垣 賢二| |
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発行日 | 2004-02 |
出版物タイトル | 岡山大学農学部学術報告 |
巻 | 93巻 |
号 | 1号 |
資料タイプ | 紀要論文 |
著者 | 井上 浩之| 田村 隆| 稲垣 賢二| 田中 英彦| |
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発行日 | 1998-02 |
出版物タイトル | 岡山大学農学部学術報告 |
巻 | 87巻 |
号 | 1号 |
資料タイプ | 紀要論文 |
著者 | Tamura, Takashi| Tsunekawa, Naoki| Nemoto, Michiko| Inagaki, Kenji| Hirano, Toshiyuki| Sato, Fumitoshi| |
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発行日 | 2016-01-28 |
出版物タイトル | Scientific reports |
巻 | 6巻 |
資料タイプ | 学術雑誌論文 |
タイトル(別表記) | Recombinant expression and characterization of quinone-containing novel glycine oxidase from Marinomonas mediterranea |
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フルテキストURL | srfa_109_001_006.pdf |
著者 | 梶山 雄輝| 溝端 佐津紀| 赤地 周作| 根本 理子| 田村 隆| 稲垣 賢二| |
抄録 | Novel glycine oxidase (GlyOX) from Marinomonas mediterranea depends on cysteine tryptophilquinone (CTQ) and catalyzes the oxidative deamination of glycine to produce a glyoxylate, ammonia, and hydrogen peroxide. M. mediterranea GlyOX genes (goxA and goxB) were cloned and recombinant GlyOX was heterologously expressed by E. coli. The purification of recombinant GlyOX was carried out by metal affinity and DEAE-Toyopearl 650M column chromatographies. M. mediterranea GlyOX was homotetramic with a molecular mass of 76kDa and showed optimum activity around 30°C and at pH 5.0, and stability below 50°C and between pH 5.0 to 9.0. M. mediterranea GlyOX shows a strict substrate specificity toward glycine, and the Michaelis constant for glycine was 0.5mM. M. mediterranea GlyOX could determine the quantity of glycine in human serum and human blood plasma with high sensitivity. This study revealed the catalytic and structural properties of M. mediterranea GlyOX with high substrate specificity. |
キーワード | glycine oxidase Marinomonas mediterranea cysteine tryptophilquinone recombinant expression enzymatic glycine assay |
出版物タイトル | 岡山大学農学部学術報告 |
発行日 | 2020-02-01 |
巻 | 109巻 |
開始ページ | 1 |
終了ページ | 6 |
ISSN | 2186-7755 |
言語 | 日本語 |
論文のバージョン | publisher |
著者 | 田村 隆| 李 銀淑| 田中 英彦| 稲垣 賢二| |
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発行日 | 2002-02 |
出版物タイトル | 岡山大学農学部学術報告 |
巻 | 91巻 |
号 | 1号 |
資料タイプ | 紀要論文 |
著者 | Oshima, Kenshiro| Hattori, Masahira| Shimizu, Hitomi| Fukuda, Koji| Nemoto, Michiko| Inagaki, Kenji| Tamura, Takashi| |
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発行日 | 2015-07-09 |
出版物タイトル | Genome Announcements |
巻 | 3巻 |
号 | 4号 |
資料タイプ | 学術雑誌論文 |
フルテキストURL | fulltext.pdf |
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著者 | Nemoto, Michiko| Iwaki, Sayako| Moriya, Hisao| Monden, Yuki| Tamura, Takashi| Inagaki, Kenji| Mayama, Shigeki| Obuse, Kiori| |
キーワード | Biomineralization Diatom Silica Transcriptome Proteome |
備考 | This is a post-peer-review, pre-copyedit version of an article published in Marine Biotechnology. The final authenticated version is available online at: http://dx.doi.org/10.1007/s10126-020-09976-1.| |
発行日 | 2020-06-03 |
出版物タイトル | Marine Biotechnology |
出版者 | Springer |
ISSN | 1436-2228 |
NCID | AA11357643 |
資料タイプ | 学術雑誌論文 |
言語 | フランス語 |
OAI-PMH Set | 岡山大学 |
論文のバージョン | author |
PubMed ID | 32488507 |
DOI | 10.1007/s10126-020-09976-1 |
Web of Science KeyUT | 000537432000001 |
関連URL | isVersionOf https://doi.org/10.1007/s10126-020-09976-1 |
著者 | スィアオ テッキョン| 稲垣 賢二| 田村 隆| 田中 英彦| |
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発行日 | 1997-02 |
出版物タイトル | 岡山大学農学部学術報告 |
巻 | 86巻 |
号 | 1号 |
資料タイプ | 紀要論文 |