RNAポリメラーゼに対するZnキレート剤: 1, 10-phenanthrolineの作用

マウス腹水肉腫細胞より分離したRNAポリメラーゼI, IIに対する亜鉛のキレート剤, 1, 10-phe-nanthroline (OP) の作用を検討した.RNAポリメラーゼI活性を50%阻害するOP濃度は2mMであった.RNAポリメラ-ゼII活性はOPで阻害されなかった.RNAポリメラーゼとOPとを予めインキュベートしても,阻害の程度は変化せず, OPを除去すると阻害は回復することから, OPはポリメラーゼ分子内に強く結合している亜鉛に可逆的に結合することが示唆された.OPはRNAポリメラーゼIの転写開始反応を選択的に阻害することが示唆された.核内でクロマチンに結合したRNAポリメラ-ゼIの活性もOPによって分離酵素と同程度に阻害され,OPの結合部位が,分離ポリメラーゼIと同様にOPと結合できる状態にあることが示唆された.

The effects of a zinc chelator, 1, 10-phenanthroline on RNA polymerase from RSV-induced mouse ascites sarcoma cells were studied. RNA polymerase I was inhibited at the initiation step by 2 mM 1, 10-phenanthroline. RNA polymerase II was not inhibited. The enzymes were not inhibited by a related compound, 4, 7-dimethyl-1, 10-phenanthroline, which is not a zinc chelating agent. The inhibition of RNA polymerase I was reversible. The chelating agent reduced the Km value for nucleoside triphosphates and inhibited the RNA polymerase I at the first phosphodiester bond formation step. Endogenous RNA polymerase I activity in nucleotide permeable cells (prepared by treatment of SR-C3H/He cells in hypotonic buffer) was inhibited by 1, 10-phenanthroline. The results suggest that RNA chain initiation at the first phosphodiester formation with RNA polymerase I occur in permeable SR-C3H/He cells.