検索

The method of identifying human blood is studied from the standpoint of the fibrinolytic enzyme system by means of the "fibrin plate method" and the following results are obtained: 1) "Fibrin plate method" is, in the point of its sensitivity and speciesspecificity, one of the most excellent methods for the identification of human blood. 2) A small amount of the blood stains left standing as long as for 5 to 30 years can serve in the determination of the human blood. 3) Putrefied fluid blood does not demonstrate fibrinolysis. 4) Blood stains absorbed in various objects can also he identified whether they are of the human origin or not. 5) The pieces of cloth stained with human blood give positive fibrinolysis even after four washings with soap or after heating at 100°C for one hour. On the other hand, positive results are obtained with the pieces of cloths after three washings by benzidine test and with the physiological saline-extracted solution obtained after two washings of pieces of cloth, by precipitation test. 6) Proactivator has been found to contain globulin fraction in human serum protein. 7) The blood type can be determined with the same materials previously examined by the "fibrin plate method".

By far the majority of studies and speculations on metabolism in man and animals have been concerned with the fate of proteins, fats, and carbohydrates. Even when interest was awakened in enzymes and vitamins, the transformation of the organic substances was still studied. Gradually, however, various methods of the analysis and measuring instruments used have been so perfected that other problems can now be included in the field of biological and medical researches, namely, the significance of inorganic substances for the living organism.

Histochemical studies of several oxidative enzymes of the muscle spindles in mouse limbs were carried out. Observations elucidated the existence of the three types of intrafusal fibers which can be distinguished from each other by the difference in the activity of oxidative enzymes as in the muscle fibers, i. e., the first one is the "red intrafusal fibers" and has the most intense activity of oxidative enzyme, the second one the "white intrafusal fibers" with a minimal activity, and the third, "medium intrafusal fibers" being distinguished by their oderate activity of oxidative enzymes from the others.

For the purpose to reveal the mechanism of the biological indirect action of X-rays the author has conducted the analysis of the compound lipids of the organs of the rabbits irradiated with X-rays. Silicic acid column chromatography was applied for the fractionation of the compound lipids. Component of each fraction was analyzed by silicic acid-impregnated paper chromatography and infra-red spectrophotometory. The result proved that the compound lipids showed some qualitative and 10+-+ quantitative changes. The changes occurred mainly in glycerophosphatides showing the formation of high level lyso-phosphatidylcholine and lysophosphatidylethanolamine. The fatty acid compositions of the compound lipids were determined by means of gas-liquid chromatography. Further, polyunsaturated fatty acids were analyzed as fatty acid bromide. Major differences found in fatty acid patterns included: in the irradiated group the amount of C18-monoenoic, C18-dienoic, C18-trienoic, C20-tetraenoic and C22-acids were decreased and of C18- and C18-monoenoic acids were increased. It has been elucidated that lysophosphatides not only posesses a strong hemolytic power but also it has an action to induce swelling of the rat liver mitochondria. And it has been suggested that the lysophosphatides and ethanolamine will be responsible, at least partially, for the cell damage induced by X-rays.

The effect of various fatty acids on the swelling-contraction and oxidative phosphorylation of mitochondria from rat liver and Ehrlich ascites tumor cell have been studied and the results are as follows: 1. The swelling of rat liver mitochondria is induced by fatty acid. The extent of this uncoupling action is in the descending order of myristate, laurate, parlmitate, stearate and behenate in saturated fatty acid and linoleate, linoleneate, richinoleate and oleate in the unsaturated fatty acid. This swelling action is stronger with unsaturated fatty acids than that of saturated ones and cis form is stronger than trans form. 2. The uncoupling oxidative phosphorylation of rat liver mitochondria is also observed with these fatty acids and the activities are proportional to the degree of the swelling action. 3. The degree of swelling of rat liver mitochondria is proportional to the concentration of oleate and is inhibited by anaerobiosis and respiratory inhibitor except amytal. 4. The mitochondria swollen by fatty acid can be recontracted reversibly by ATP, Mg++ and bovine serum albumin. 5. The swelling action of sodium oleate is the strongest on mitochondria from rat liver, followed by those from the liver of Ehrlich ascites tumor bearing mouse, Ehrlich ascites tumor cells and solid Ehrlich tumor cells. 6. Sodium oleate inhibits the incorporation of 32p into ATP, ADP, GTP and UDPG in mitochondria.

Our experience with Brachet test on twenty-four leukemic patients has shown a high degree of reliability of the test for differentiating acute leukemias. A standard method has been described which is simple enough to be carried out routinely. The test, however, is not without pitfalls and need be interpreted with some caution. From the fact that urine hydrolysis can be closely simulated by the enzymatic action of pure DNase solution, it is suggested that the urine factor responsible for the nuclear lysis is DNase excreted in the human urine. The possible mechanism and implication of the test have been discussed in relation to the results obtained.

The effects of high fatty acids such as oleic, richinoleic, linoleic, linolenic, palmitic and stearic acids, on the respiration, glycolysis, organic phosphate synthesis of Ehrlich ascites tumor cells, were studied. The unsaturated fatty acids added to the media enhanced the respiration of the tumor cells at the concentration lower than 0.2 mM, after a short incubation period and inhibited the respiration in a high concentration 0.4 mM. The saturated fatty acids did not show such effect. All the fatty acids, both of saturated and unsaturated, effected the increase in lactate formation in tumor cells, especially markedly at higher concentration being accompanied by the WQ increase and RQ around 1. The respiration lowered by the fatty acids was ameliorated by the addition of glucose. The lactate formation from glucose was greatly enhanced by the addition of fatty acids but hardly from pyruvate. The unsaturated high fatty acids proved to have a strong uncoupling action for oxidative phosphorylation. This effect could be recognized slightly in the saturated fatty acids. The addition of high fatty acid resulted in the striking decrease in ATP and ADP with the increase in AMP. With these results the discussion was conducted concerning the specificity of tumor cell related to the glucose and fatty acid metabolism.

1. Morphological observations were carried out on the strain HeLa cells cultured under various oxygen tension. 2. The growth of the strain HeLa cells in the present experiments was markedly inhibited when they were cultured under high oxygen tension or in nitrogen gas environment. It has been clarified that air offers the most optimal gas environment. 3. Effects of the changed gas environment on the fine structures of HeLa cells were studied by phase contrast microscope and electronmicroscope. As the results it has been found that in these cells cultured under a high oxygen tension there occurs a marked swelling of mitochondria. Under anaerobic condition, however, these cells undergo degeneration, as in oxygen environment revealing no swelling of mitochondria but rather contraction. 4. Endoplasmic reticulum (ER) of HeLa cells cultured under oxygen environment is transformed from its vesicular form to lamellar form. The mechanism of lamellar transformation of ER is obscure but no morphologic connection with nuclear, cytoplasmic and mitochondrial membranes has been detected. 5. A discussion was made on these findings concerning the changes in fine structures of the cells, with a special reference to the swelling of mitochondria and morphological changes of ER under oxygen environment.

The fibrinolytic activity of plasmin present in menstrual blood has been studied by means of the Fibrin-Plate Method, and utilizing the findings of such a study, the identification of menstrual blood stain in legal medicine has been conducted. As the result, it has become clear that the identification of a very small amount of menstrual blood is possible, for an example, only one thread from the menstrual blood stained cloth 1.0 cm2. in size, and with the blood stain left in a room temperature for as long as two years, or with the blood stain left in water for one month, it is possible to identify menstrual blood. Aside from menstrual blood, no other toco-gynecological blood responds to this Fibrin-Plate Method.

As the results of present study on plasmin in menstrual blood by means of the Fibrin-Plate Method, a large amount of plasmin as much as dilution of 1: 100 or 1:1,000 of the menstrual blood serum, has been found in a natural form and it is deduced that the incoagulability of menstrual blood is the result of the plasmin formation in the same blood serum. Further, it has been recognized that this plasmin is found in a rather large quantity in the blood of the second menstrual day and it is decreased by the fifth day. In addition, the plasmin of menstrual blood is contained in the globulin fraction of the same serum, especially markedly in β-globulin fraction. On the other hand, it has also been clarified that in the circulating blood during menstruation no plasmin is present in natural state and that a large quantity of inactive plasminogen still exists in menstrual blood.

The authors have succeeded in isolating a biologically-active leukemia virus from leukemic tissues of AKR mice with a fluorocarbon. From the chemical analysis of the biologically-active virus fraction it has been clarified that the AKR leukemia virus is of the RNA type.

<P>Daβ der anaphylaktische Antikorper mit dem Prazipitin identisch ist, ist zweifellos aus den zahlreichen Arbeiten vom hiesigen Institut ersichtlich. Der anaphylaktische Schock, welcher durch die Bindung des im Organismus vorhandenen Prazipitin mit dem eingefuhrten Prazipitinogen verursacht wird, ubt vielleicht auf verschiedene Organe eine Reaktion aus. Daβ die Blutdrucksenkung trotz der Leberausschaltung aus der Zirkulation auftritt, beruht wahrscheinlich auf der Veranderung der allgemeinen Zirkulation, die durch die Reaktion des anaphylaktischen Schocks auf Nervensystem, Blutgefassen, Blut usw. sekundar hervorgerufen wird. In kurzen Worten, man erkennt, daβ die Blutdrucksenkung beim anaphylaktischen Schock bei sensibilisierten Hunden trotz der Ent-fernung des Magendarmkanales und der Leberausschaltung aus der Zirkulation durch die Antigenreinjektion auftreten kann. Ich glaube, daβ die Blutdrucksenkung eine sekundare Erscheinung ist, bedingt durch die Antigen-Antikorperperbindung in vivo. </p>

<P>1. Das Antiserum, das aus bei 120℃ 30 Minuten lang erhitztem Serum hergestellt wurde, zeigt die typische Zustandsspezifitat; es reagiert auf Alkali-Hitze-Eiweiβ und Formalin-Hitze-Eiweiβ und nur schwach auf native Antigene. Die Reaktion auf Jodeiweiβ und Nitroeiweiβ bleibt immer negativ. 2. Das 120℃-Eiweiβ zeigt sowohl eine Zustandsspezifitat als auch eine Artspezifitat. 3. Der Isoantikorper des 120℃-Eiweiβes kann nur durch mehrmalige Injektionen erzielt werden. 4. Das Antijod- und Antinitroeiweiβimmunserum zeigen nach der Antigenverdunnungsmethode die absolute Zustandsspezifitat, nach der Antikorperverdunnungsmethode bleiben jedoch beide Spezifitaten erhalten, vorwiegend Zustands- und relative Artspezifitat. 5. Der Isoantikorper von Jodeiweiβ und Nitroeiweiβ kann nur durch mehrmalige Injektionen erzielt werden. 6. Der Autoantikorper des Jodeiweiβes wurde nur bei einem Kaninchen aus einer Zahl von 6 Kaninchen erzielt. 7. Die Spezifitatsvariation ist durch die konstitutive Versuchsanordnung nach der Antikorperverdunnungsmethode klarer erkannt worden. Zum Schluβ mochte ich Herrn Prof. Dr. M. Ogata fur seine freundliche Hilfleitung wahrend der Durchfuhrung meiner Untersuchungen meinen besten Dank aussprechen.</P>

<P>Bei subkutanen, intravenosen und ins Lymphgefaβ injizierten Immunisierungsweisen bei normalen oder blockierten Kaninchen sind keine Besonderheiten in bezug auf Auftreten oder hochsten Titer des Prazipitins vorhanden. Aber wenn man die Prazipitinreaktion im Anfangsstadium beobachtet, so kann man bei der Immunisierung ins Lymphgefaβ bei normalen Kaninchen eine besondere Erscheinung, d. h. das Auftreten der Prazipitinreaktion im Bindungszonenteile bemerken. Endoh berichtete schon, daβ das durch die Injektion mit der minimalen Antigenmenge gebildete Prazipitin im Bindungs-zonenteile zuerst und sagte, daβ man das diese Erscheinung zeigende Prazipitin gewinnt, wenn die minimale Antigenmenge ganz allmahlich resorbiert wird, da ja auch Sunouchi4) durch die Injektion mit gekochten Antigenen, Haku5) durch die Injektion des Peptons (Teruuchi) gleiche Erscheinung nachgewiesen hatten. In obigen Fallen ist die Antigenmenge von Anfang an oder durch physikalische oder chemische Einwirkung zu geringfugig, um der gewohnlichen Anti korperbildung zu dienen. In meinem Falle ist es etwas besonders, weil die injizierte Antigenmenge der gewohnlichen gleichkommt und ich auf Antigen keinen Eingriff ausube. Diese Erscheinung tritt bei blockierten Kaninchen nicht auf. Also muβ man dabei die Funktion der Lymphdrusen in Betracht ziehen. Ich glaube, daβ das Antigen die Lymphdruse erreicht und dann die Lymphdruse auf das Antigen in derselben Art wie bei der Injektion des minimalen Antigens von Endoh einwirkt und diese besondere Erscheinung sich zeigt, wenn das Antigen bei normalen Kaninchen ins Lymphgefaβ injiziert wird.</P>

<P>Der Milcheiweiβkorper besteht aus dem Milchkasein, -globulin und -albumin, der Serumeiweiβkorper aus dem Serumglobulin und -albumin. Kollmeyer10), Bauer und Kleinschmidt11) bestatigten, daβ das Milchkasein nur in der Milchdruse spezifisch erzeugt wird. Die Beziehungen zwischen den einzelnen Milcheiweiβkorpern und Serumeiweiβkorpern wurden serologisch und chemisch bis jetzt genau festgestellt. Es ist schon bekannt, daβ das Kasein auβergewohnlich koktstabil ist, so daβ seine Antigenitat, d.h. das Prazipitinogen und die Prazipitabilitat, trotz Warmezusatz unverandert bleibt. Die Milchmolke dagegen ist sehr koktlabil; daher wird die Antigenitat, d.h. das Prazipitinogen und die Prazipitabilitat, durch Erhitzung ziemlich leicht zerstort. Es gibt aber wenige Berichte uber Untersuchungen, die den Verminderungsgrad der Prazipitinogenitat der Milch bei steigender Warmewirkung systematisch feststellen wollen. Daher untersuchte ich die Verminderung der Prazipitinogenitat der Milch als Ganzes und verglich sie mit der des Serums. Bei Erhitzung bis zu 80℃ geht die Verminderung sowohl bei der Milch als auch bei dem Serum parallel, aber die Verminderung der Milchprazipitinogenitat wird bei Erhitzung von mehr als 90℃ nicht mehr beobachtet. Sie bleibt bei Erhitzung auf 120℃ noch gut erhalten, wahrend die des Serums durch Erhitzung bei 90℃ stark vermindert oder ganz vernichtet wird. Besonders klar kann die Prazipitinogenitatsverminderung des Serums nach der Antikorperverdunnungsmethode festgestellt werden. Die Zustandsspezifitat der Milch wird durch Erhitzung bei 80℃ noch nicht, bei 100℃ schwach, bei 120℃ deutlich nachgewiesen, wahrend die des Serums bei 80℃ schwach, bei 100℃ und auch bei 120℃ ziemlich hochgradig nachgewiesen werden kann. Auf Grund dieser Tatsachen kann man wohl vermuten, daβ durch schwache Erhitzung nur die Milchmolke angegriffen wird, wahrend das Kasein unverandert bleibt. Erst durch starke Erhitzung wird auch das Kasein angegriffen, erst dann also kann die Zustandsspezifitat der ganzen Milch in der Reaktion nachgewiesen werden. Meine eigenen Versuchsresultate fasse ich folgendermaβen kurz zusammen: 1. Die Prazipitinogenitat der Milch wird durch die Hitzewirkung abgeschwacht, sie ist aber gegen starke Erhitzung hitzebestandig, wahrend die Prazipitinogenitat des Serumeiweiβes schon durch Erhitzung bei 90℃ stark vermindert oder ganz vernichtet wird. 2. Die Zustandspezifitat der Milch ist bei schwacher Erhitung schwerer als die des Serums nachweisbar. An dieser Stelle sei besonders Herrn Prof. Dr. M. Ogata mein warmster Dank ausgesprochen fur die mannigfachen, sowohl wahrend der Periode der Untersuchungen als auch bei Abfassung der Arbeit empfangenen Anregungen.</P>

1. The inhibition of the heart beats through vagus nerve stimulation is more pronounced in the poisoned heart muscle than in the normal one. The degree of contraction recovers gradually after the cessation of stimulation, it shows no phase of compensation. 2. The absolute refractory period of the poisoned heart muscle diminishes as the poisoning proceeds.3. The shortening of the absolute refractory period of the poisoned heart muscle through the application of acetylcholin is maintained long after the removal of acetylcholin, though it recovers its previous condition in the normal heart muscle.4. The shortening of the absolute refractory period of the poisoned heart muscle through the vagus nerve stimulation does not recover after the cessation of the stimulation, and if the stimulation be continued longer, the refractory period becomes shorter. 5. In the last stage of poisoning the heart muscle falls spontaneously or by a single stimulation into a peculiar type of contracture.

1. Der Kalkgehalt des Blutes von Kaninchen wird durch Zufuhr der in Alkohol oder in Ather loslichen Fraktion des Leberextraktes des Kaninchens erhoht. Diese Steigerung des Blutkalkgehaltes tritt starker bei Zufuhr von alkoholloslicher Fraktron auf als bel der von atherloslicher.2. Durch die Zufuhr der von alkoholloslicher oder atherloslicher Fraktion befreiten wasserigen Fraktion wird der Blutkalkgehalt von Kaninchen fast garnicht beeinfluβt. Aus diesem Ergebnis geht hervor, daβ die hyperkalkaemisch wirksame Substanz eine in Alkohol und Ather losliche ist.