Changes in Glycinin‒Digesting Protease Activity During Soybean Germination.

　Changes in glycinin-digesting protease activity during soybean germination have been investigated. The glycinin-digesting protease activities of imbibed or germinated soybean seed were assayed by RP‒HPLC using a tryptic peptide from CM‒glycinin or by SDS‒PAGE using CM‒glycinin as the endogenous substrate. Proteolytic activities of the germinated soybean seeds were found through the whole period of germination, the activities were maintained significantly unchanged during germination for 4 days, and then those specific activities declined slowly. AE‒HPLC analysis of the glycinin-digesting protease in the imbibed or germinated soybean seeds showed unchanged peaks corresponding to glycinin- digesting activity, suggesting that the glycinin-digesting protease was not induced during germination but had already been synthesized during seed maturation.

　大豆発芽期におけるグリシニン分解酵素 (98 kDa SBP) の活性変動を解析した．大豆種子を４時間水で膨潤後， 25 ℃ 暗黒下で発芽させた．経時的にサンプリングを行い，2M NaCl を含むトリス緩衝液 (㏗ 7.0) により粗酵素を抽出 後，グリシニン由来のトリプシン分解ペプチドを基質としてグリシニン分解酵素の活性変動を逆相 HPLC により追 跡した．その結果，種子膨潤後４日間比活性はほぼ一定の値を保ち，以後徐々に低下することが分かった．次いで， 粗酵素溶液からイオン交換 HPLC により98 kDa SBP を部分精製するとともに，発芽期における 98 kDa SBP の消長 を解析したところ，98 kDa SBP は乾燥種子及び各発芽段階の種子中全てに認められ，かつグリシン分解活性もグリ シニン由来のトリプシン分解ペプチド基質に対する活性と同様に認められた．以上の結果から，98 kDa SBP は種子 発芽に伴い誘導されるプロテアーゼではなく，種子貯蔵型のプロテアーゼであることが明らかになった．

原著論文 (Original paper)