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ID 11730
Eprint ID
11730
FullText URL
Title Alternative
Measurement of intracellular pH by flow cytometry using pH sensitive fluorescence dye, and influence of hyperthermia and amiloride derivatives on the intracellular pH
Author
Kawasaki, Shoji
Hiraki, Yoshio
Abstract
エールリッヒ腹水癌細胞とそのアドリアマイシン耐性細胞において蛍光pH指示薬2'、7'-bis-(2-carboxyethyl) carboxyfluorescein] (BCECF) の蛍光量をフローサイトメトリーで測定することによって細胞内pHの検量曲線を作成することができた。このことより、これらの細胞においてBCECFの蛍光量で細胞内pHの変化を簡易に比較できることを示唆した。さらに、温熱、Na(+)/H(+) exchanger の阻害例であるアミロライド[3,5-diamino-6-chloro-N-(diaminomethylene) pyrazinecarboxamide]、およびアミロライド誘導隊MH-12-43[N-amidino-3-amino-6-chloro-5-(N-ethyliso-propylamino) pyrazinecarboxyamide] の細胞内pHへの影響をエールリッヒ腹水癌細胞で観察した。37℃では、0.5mMアミロライド、0.05mM MH-12-43により細胞内pHは減少し、42℃処理によりさらに減少した。42℃において、0.05mM MH-12-43による細胞内pHの減少は、0.5mMアミロライドによる減少より大きかった。
Abstract Alternative
We examined relationship between intensity of intracellular fluorescence of [2', 7'-bis-(2'-carboxyethyl) carboxyfluorescein] (BCECF) and intracellular pH in Ehrlich ascites tumor cells and their adriamycin-resistant strain, and found a good correlation between them at both strains. This suggests that changes in the intracellular pH on these strains may be obtained through measurement of intracellular fluorescence of BCECF by flow cytometry. Further, we examined influence of hyperthermia, 3, 5-diamino-6-chloro-N-(diaminomethylene)pyrazinecarboxamide (amiloride), an inhibitor of Na(+)/H(+) exchanger, and its derivative; N-amidino-3-amino-6-chloro-5-(N-ethylisopropylamino) pyrazinecarboxyamide (MH-12-43) on the intracellular pH in Ehrlich ascites tumor cells. The treatment of 0.5mM amiloride or 0.05mM MH-12-43 reduced intracellular pH at 37℃, while the more reduction was observed by the treatment at 42℃. The reduction of intracellular pH by 0.05mM MH-12-43 was more substantial than that of 0.5mM amiloride at 42℃.
Keywords
BCECF
細胞内pH (Intracellular pH)
フローサイトメトリー (Flow Cytometry)
アミロライド (Amiloride)
MH-12-43
Published Date
1996-02-29
Publication Title
岡山大学医療技術短期大学部紀要
Publication Title Alternative
Bulletin of School of Health Sciences Okayama University
Volume
volume6
Publisher
岡山大学医療技術短期大学部
Publisher Alternative
School of Health Sciences Okayama University
Start Page
1
End Page
5
ISSN
0917-4494
NCID
AN10355371
Content Type
Departmental Bulletin Paper
language
日本語
File Version
publisher
Refereed
False
Eprints Journal Name
fhs